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TECHNICAL ARTICLES分光光度法的重要的一個物理化學量是吸光度。為了獲得準確的研究結果,準確測得樣品溶液的吸光度是非常重要的。一般,分析結果的不可靠性與偶然誤差和系統(tǒng)誤差有關。
偶然誤差影響測量的精密度,可通過足夠數(shù)量測量的統(tǒng)計處理來減少;系統(tǒng)誤差影響測量結果的準確度,可在大體相同實驗條件下,用比較一種物質的準確測量結果,使系統(tǒng)誤差統(tǒng)一起來。
而紫外分光光度計的系統(tǒng)誤差(波長校正、分光光度計的慢散光、放大器的線性響應、暗電流和比色皿的光程)和操作誤差(溫度改變、儀器讀數(shù)、操作者的改變、使用物質的純度、稱量和濃度、pH)對測量吸光度的影響是可以檢查和校正的。
關于操作誤差,多數(shù)情況下,通過嚴格按操作程序測量、儀器調零、準確稱量等來控制或減少這種誤差的產生。關于儀器的系統(tǒng)誤差,可通過對分光光度計的定期校正來克服,若所需準確度很高的測量,則必須天天校正。
紫外分光光度計具體校正內容如下:
1、波長的準確度試驗 以儀器顯示的波長數(shù)值與單色光的實際波長值之間誤差表示,應在±1.0nm范圍內。可用儀器中氘燈的486.02nm與656.10nm譜線進行校正;
2、吸收度的準確度試驗;
3、雜散光的試驗;
4、波長重現(xiàn)性試驗;
5、分辨率試驗。
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